纯化磁珠的实验步骤

　　纯化磁珠适合于从各种PCR产物或酶促反应液中高通量快速地回收100bp~50kb的DNA/RNA的片段，回收效率高达80%。能有效地去除PCR产物或酶促反应液中的寡聚核甘酸、引物二聚体、盐、蛋白质等污染。
纯化磁珠的操作步骤：
自备试剂：
洗涤液：85%乙醇；
洗脱液：BufferEB(10mMTris-HCl，pH8.0)或去离子水(pH在7.0~8.0之间)。
磁力架：(建议使用深圳艾维迪泰生物科技有限公司针对200μLPCR管磁力架，货号：BMB32-0.2)
实验步骤：
1.充分混合震荡磁珠，使管内磁珠*均匀悬浮起来。
2.向样品管(可使用200μLPCR管或96孔板)中加入待纯化的DNA样品溶液。
3.取1.8×样品体积的磁珠溶液加入样品管中，漩涡震荡5秒后，室温静止结合5min。
注：放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀，以保证磁珠处于悬浮状态。
4.将样品管置于磁力架上2min左右或待磁珠被磁力架装置*吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液枪吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
5.保持样品管在磁力架上，向管内慢慢加入300μL85%乙醇，保持样品管不离开磁力架以及磁珠团始终被吸附在管壁上，禁止分散开。
6.将样品管置于磁力架上2min左右或待磁珠被磁力架*吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液枪吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
7.重复步骤5~6，将管内的液体全部吸除干净。
8.将样品管从磁力架上取出，于室温放置3~5min，使残留乙醇充分挥发。
注：避免真空干燥，磁珠过于干燥将会降低DNA/RNA洗脱效率。
9.向管内加入20~100μL洗脱液，并用移液枪轻轻吹打5-10次，使磁珠重悬混匀，操作过程中应避免产生气泡。
10.室温放置5min以充分洗脱。
注：为了提高洗脱效率，放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀，以保证
磁珠处于悬浮状态。
11.将洗脱样品管放回磁力架上2min或待所有磁珠都被磁力架装置*吸附。
12.小心地将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中，在转移过程不要碰到磁珠，如出现磁珠悬起现象请重复步骤11~12。
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